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SEM掃描電鏡的微生物樣品制備方法介紹

日期:2024-01-26 09:17:08 瀏覽次數(shù):87

SEM掃描電鏡的微生物樣品制備方法包括以下步驟:

取樣:用無(wú)菌剪刀從陽(yáng)極上剪下一塊2 mm直徑大小的電極生物膜樣品。

固定:將電極生物膜樣品放入5 mL的離心管中,加入2.5%,pH=6.8的戊二醛,置于4℃冰箱中固定1.5 h。

掃描電鏡.jpg

沖洗:用pH=6.8的磷酸緩沖溶液沖洗3次,每次10 min。每次沖洗時(shí)先用注射器(含針頭)緩慢吸走上一步驟的沖洗液。

脫水:分別用濃度為50%,70%,80%,90%的乙醇進(jìn)行脫水,每次10-15min,再用****的乙醇脫水3次,每次10-15 min。

置換:****乙醇、乙酸異戊酯=1:1和純乙酸異戊酯各置換一次,每次15 min。

干燥:將置換后的樣品用針頭挑出,使用CO2臨界點(diǎn)干燥儀對(duì)樣品進(jìn)行干燥。

粘樣:用導(dǎo)電膠布將樣品觀察面向上粘貼在掃描電鏡鋁板上,放入干燥器內(nèi)。

噴金:用B離子濺射鍍膜儀在樣品表面鍍上一層1500nm厚度的Au膜。

進(jìn)樣和觀察:將樣品固定在掃描電子顯微鏡的進(jìn)樣室,調(diào)整好樣品角度后將進(jìn)樣室推入機(jī)器內(nèi),根據(jù)電壓定值(20keV)預(yù)設(shè)樣品高度并開始抽真空,操作SEM對(duì)樣品進(jìn)行拍照。

以上步驟完成后,您可以使用SEM掃描電鏡觀察微生物樣品,以了解其形貌和結(jié)構(gòu)等信息。

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