顯微鏡的分辨力的大小由物鏡的分辨力來(lái)決定的，而物鏡的分辨力又是由它的數(shù)值孔徑和照明光線(xiàn)的波長(zhǎng)決定的。

　　當(dāng)用普通的中央照明法（使光線(xiàn)均勻地透過(guò)標(biāo)本的明視照明法）時(shí)，顯微鏡的分辨距離為d=0.61λ/NA

　　式中d——物鏡的分辨距離，單位 nm。

　　λ——照明光線(xiàn)波長(zhǎng)，單位 nm。

　　 NA ——物鏡的數(shù)值孔徑

　　例如油浸物鏡的數(shù)值孔徑為1.25，可見(jiàn)光波長(zhǎng)范圍為400—700nm ，取其平均波長(zhǎng)550 nm，則d=270 nm，約等于照明光線(xiàn)波長(zhǎng)一半。一般地，用可見(jiàn)光照明的顯微鏡分辨力的極限是0.2μm。